人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin,HCG）是由滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，由α和β兩個(gè)亞基組成，α亞基負(fù)責(zé)與相應(yīng)受體結(jié)合，β亞基發(fā)揮生活學(xué)活性。由于α亞基與垂體分泌的卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和促甲狀腺激素（TSH）的α亞基相似，而β亞基則是特異的，因此一般用針對(duì)β-HCG的抗體來(lái)測(cè)定標(biāo)本中的HCG，以防止出現(xiàn)交叉反應(yīng)。
因?yàn)镠CG的濃度與懷孕的進(jìn)程密切相關(guān)，因此常用來(lái)診斷早期妊娠、異位妊娠、先兆流產(chǎn)、產(chǎn)后及人工流產(chǎn)術(shù)后的監(jiān)測(cè)。臨床常用來(lái)檢測(cè)HCG的標(biāo)本包括血清和尿液兩種，而常用的檢測(cè)方法則有早孕試紙（通常為膠體金法）和發(fā)光法的定量檢測(cè)，通常情況下都是用早孕試紙對(duì)尿液標(biāo)本進(jìn)行定性檢測(cè)，而用發(fā)光法對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行定量檢測(cè)，大多數(shù)情況下兩者檢測(cè)結(jié)果具有一致性，但也有少數(shù)情況下兩者結(jié)果并不一致，今天就和大家一塊學(xué)習(xí)下兩者結(jié)果不一致的可能原因。
兩種檢測(cè)方法的原理
在分析原因前我們首先看一下兩種檢測(cè)方法的原理，因?yàn)楦闱宄z測(cè)原理對(duì)我們理解結(jié)果的不一致至關(guān)重要。
首先，我們來(lái)看一下早孕試紙也就是膠體金法的檢測(cè)原理：膠體金法檢測(cè)HCG
采用的是雙抗體夾心法，由抗β-HCG單克隆抗體和抗鼠的多克隆抗體分別固定于硝酸纖維膜的檢測(cè)（T）區(qū)和質(zhì)控（C）區(qū)，而膠體金標(biāo)記的抗α-HCG單克隆抗體作為流動(dòng)相，當(dāng)標(biāo)本中含有HCG時(shí)，標(biāo)本中的HCG首先和膠體金標(biāo)記的抗α-HCG單克隆抗體結(jié)合，流動(dòng)到T區(qū)時(shí)，和T區(qū)的抗β-HCG單克隆抗體結(jié)合被固定，造成T線顯色，剩余的流動(dòng)相繼續(xù)流動(dòng)到C區(qū)與抗鼠的多克隆抗體結(jié)合，造成C線顯色。
其次，我們?cè)賮?lái)看一下發(fā)光法的檢測(cè)原理，不同廠家的發(fā)光法原理存在著差異，但基本原理是一樣的，都是雙抗體夾心法，其中一個(gè)抗體固定在相應(yīng)的固相上（例如磁微粒），另一個(gè)為標(biāo)記抗體，與膠體金法不同的時(shí)，兩個(gè)抗體是針對(duì)不同抗原位點(diǎn)的抗β-HCG單克隆抗體。
雖然膠體金法和發(fā)光法均采用雙抗體夾心法，但由于所用抗體、標(biāo)記物、方法學(xué)等的不同，二者在檢測(cè)結(jié)果方面存在著差異：
1、膠體金法是定性方法，而發(fā)光法是定量方法；
2、膠體金法由于用的兩種抗體是抗α-HCG單克隆抗體和抗β-HCG單克隆抗體，因此檢測(cè)的是完整的HCG，而無(wú)法檢測(cè)游離的β-HCG，而發(fā)光法使用的是兩種不同的抗β-HCG單克隆抗體，除了可以檢測(cè)完整的HCG，還可以檢測(cè)游離的β-HCG；
3、兩者的檢測(cè)敏感度及檢測(cè)范圍不同，膠體金法的檢測(cè)下限在20-40mIU/ml，而發(fā)光法可以檢測(cè)到1mIU/ml以下，發(fā)光法的檢測(cè)范圍也遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膠體金法，在HCG濃度很高時(shí)，更不容易出現(xiàn)鉤端效應(yīng)。
HCG結(jié)果不一致原因分析
1、HCG濃度低造成的檢測(cè)結(jié)果不一致
我們前面提到過(guò)膠體金法和發(fā)光法的檢測(cè)下限存在著差異，當(dāng)標(biāo)本中的HCG濃度比較低時(shí)，會(huì)出現(xiàn)發(fā)光法陽(yáng)性而膠體金法陰性的不一致結(jié)果。HCG濃度低也存在不同情況，有可能是病人標(biāo)本中的HCG濃度本身就低，還有可能是人為稀釋造成的，例如孕初期病人做B超前要憋尿，大量飲水造成尿液稀釋，這時(shí)候也會(huì)出現(xiàn)尿HCG陰性，而血HCG陽(yáng)性的情況。
2、HCG變體造成的檢測(cè)結(jié)果不一致
在人體內(nèi)HCG并不是一成不變的，除了規(guī)則HCG以外，還存在多種變體，例如：高糖基化hCG、游離β-HCG、游離α-HCG，以及各種不同的hCG碎片，如缺刻分子hCG、缺刻的游離β-HCG、高糖基化游離β-HCG以及在尿中檢到的游離β-HCG核心片段。這些HCG變體也會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的差異，例如β-HCG核心片段僅在尿液中可以檢測(cè)到，高濃度的β-HCG核心片段可以產(chǎn)生鉤狀效應(yīng)，使尿HCG產(chǎn)生假陰性，而血HCG則不受其影響依然為陽(yáng)性。
3、抗體干擾造成的檢測(cè)結(jié)果不一致
由于現(xiàn)在HCG檢測(cè)使用的抗體基本上都是鼠源性的單克隆抗體，部分患者由于與小鼠有密切接觸或者曾被小鼠咬傷過(guò)或者接受過(guò)鼠源性抗體治療，體內(nèi)存在著針對(duì)鼠源性抗體的抗抗體即非特異性的異嗜性抗體這種抗體會(huì)與HCG抗體結(jié)合，從而產(chǎn)生HCG假陽(yáng)性。但是，異嗜性抗體分子量較大，無(wú)法通過(guò)腎小球的機(jī)械屏障分泌到尿中，因此不會(huì)干擾尿HCG的檢測(cè)，此時(shí)也會(huì)產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不一致。
4、鉤狀效應(yīng)造成的檢測(cè)結(jié)果不一致
鉤狀效應(yīng)即HOOK效應(yīng),是指由于抗原抗體比例不合適而導(dǎo)致假陰性的現(xiàn)象，其中抗體過(guò)量叫做前帶效應(yīng)，抗原過(guò)量叫做后帶效應(yīng)。懷孕8-10周時(shí)孕婦體內(nèi)HCG濃度達(dá)到峰值，有些孕婦體內(nèi)HCG濃度可以達(dá)到數(shù)十萬(wàn)，此時(shí)過(guò)高的HCG可能會(huì)造成檢測(cè)中出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)，導(dǎo)致假陰性的出現(xiàn)，由于膠體金法的檢測(cè)范圍較窄，更容易受鉤狀效應(yīng)的影響，而發(fā)光法檢測(cè)范圍寬，比較不容易受鉤狀效應(yīng)的影響，此時(shí)也會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的不一致。
5、其他垂體激素干擾造成的檢測(cè)結(jié)果不一致
由于HCG的α亞基與垂體分泌的卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和促甲狀腺激素（TSH）的α亞基相似，而β亞基與LH的β亞基結(jié)構(gòu)也非常相似（在121個(gè)氨基酸分子中,有97個(gè)兩者是完全相同的），因此一些高濃度的垂體激素會(huì)造成交叉反應(yīng)，造成檢測(cè)結(jié)果的不一致。但由于現(xiàn)在的檢測(cè)試劑都是高純度的抗β-HCG單克隆抗體，這種交叉反應(yīng)已經(jīng)非常罕見(jiàn)。
6、不同試劑不同方法學(xué)造成的檢測(cè)結(jié)果不一致
我們前面提到過(guò)檢測(cè)標(biāo)本中的HCG是不同HCG變體組成的，分子結(jié)構(gòu)有差異，但有相同抗原性的混合物。不同廠家使用的抗體不同，針對(duì)的抗原位點(diǎn)也存在著差異，因此使用不同廠家的試劑也可能造成檢測(cè)結(jié)果的不一致，有些甚至可以相差數(shù)十倍。
上面我們分析了幾種造成HCG檢測(cè)結(jié)果不一致的情況，但試劑的臨床工作中情況往往要更加復(fù)雜，一定要多多與臨床交流，根據(jù)不同的情況采取不同的檢測(cè)策略，避免踩到陷阱，讓我們的檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。
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